Hibridación in situ con fluorescencia (FISH) - Leucemia

                                        

La leucemia mieloide crónica es producida por un cromosoma Filadelfia (Ph). Por esta razón, constituye un marcador diagnóstico para la enfermedad. A nivel molecular, producto de la t(9;22) se forma el gen de fusión BCR/ABL1 .

La técnica de hibridación in situ por fluorescencia (FISH): es una técnica molecular que utiliza sondas locus-específico que hibridan en una región específica del ADN . Dicha hibridación es detectable, mediante fluorescencia, independientemente de que los núcleos estén en metafase o interfase. La sonda LSI BCR/ABL1 Dual Color Dual Fusion (DCDF) abarca los puntos de ruptura cromosómicas implicados en la t(9;22). Cada cromosoma de interés (el 9 y el 22), se marca con un fluorocromo diferente y genera un patrón de hibridación típico en aquellas células positivas a la translocación. Las variaciones en este patrón de hibridación incluyen, entre otras, deleciones submicroscópicas en el cromosoma 9 derivativo, así como ganancia de un cromosoma Ph lo que genera patrones atípicos de hibridación.

Referencia bibliográfica:

 http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892016000200006

 

Prueba PCR - Leucemia

T: Frecuencia de transcritos BCR/ABL P210 en 272 pacientes con leucemia mieloide crónica (LMC) en Bolivia

O: Determinar la frecuencia de co-expresión de los transcritos p210 en pacientes con LMC de Bolivia.

M: Muestras de médula ósea y sangre periférica recolectada en tubos EDTA de pacientes adultos y pediátricos con diagnóstico de LMC.

AN: ARN

G:  Gen de fusión BCR-ABL

PCR:  RT-PCR (reverse transcriptase polymerase chain reaction)

V: Electroforesis en gel de agarosa al 2% utilizando bromuro de etidio como colorante de revelado.

Link del Artículo de PCR:

http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-89582016000100003

Alteraciones en la Epigenética - Leucemia

La leucemia linfoblástica aguda (LLA) es el tipo de cáncer más frecuente en niños. Las alteraciones epigenéticas y genéticas contribuyen en conjunto al desarrollo y evolución de la LLA. En la LLA se han identificado alteraciones epigenéticas como: la metilación del DNA, la modificación de histonas y la regulación por RNAs no codificantes.

1. La hipermetilación del DNA en regiones promotoras es una de las alteraciones epigenéticas más frecuentes en LLA: y conlleva al silenciamiento de genes que generalmente son supresores de tumor y, en consecuencia, contribuye a la leucemogénesis.

2. Alteraciones en proteínas remodeladoras de histonas, como la sobreexpresión de enzimas desacetilasas de histonas, así como alteraciones en enzimas acetil transferasas y metil transferasas.

3. Alteraciones en la expresión de miRNAs, lo cual produce desregulación en la expresión de sus genes blanco.

Estas modificaciones epigenéticas son eventos clave en la transformación maligna, e involucran la desregulación de oncogenes como BLK, WNT5B y WISP1 y de supresores de tumor como FHIT, CDKN2A, CDKN2B y TP73, lo que afecta diversos procesos celulares fundamentales que conllevan al desarrollo de LLA.

 

Referencias bibliográfica:

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1665114616301538

Alteraciones en la traducción - Leucemia

• El inicio y la progresión del cáncer se basan en los cambios genéticos aberrantes que impulsan la oncogénesis. Se ha demostrado que varias enzimas asociadas a la cromatina influyen en la modificación postraduccional (PTM) en el ADN, las histonas y las proteínas que no son histonas. Cualquier desregulación de este grupo central de enzimas a menudo conduce al desarrollo del cáncer.

  Los miRNAs inhiben la traducción de sus mRNAs blanco a través de la interacción con la región 3’UTR. Los miRNAs están implicados en el crecimiento y desarrollo celular, metabolismo, proliferación, diferenciación y apoptosis. En cáncer, se ha observado la participación de diversos miRNAs actuando como oncogenes (oncomiRNAs), supresores de tumores y supresores o activadores de metástasis.

Referencias:

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29934362/

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1665114616301538