Terapia epigenética - Leucemia mieloide crónica

                                

Tema: Terapia Epigenética con Hidralazina y magnesio valproato revierte la resistencia a imatinib en pacientes con leucemia mieloide crónica

Mecanismo epigenómico tratado: Metilación del ADN y la desacetilación de histonas

Cómo se lo hizo: Los medicamentos epigenéticos hidralazina y el valproato para inhibir la metilación del ADN y la desacetilación de histonas.

Resultados:

Los fármacos epigenéticos hidralazina y valproato revierten la resistencia al imatinib en pacientes con LMC.

Los fármacos epigenéticos tienen una actividad importante contra las células de CML resistentes y también pueden aumentar el efecto de los TKI (inhibidores de tirosina quinasa)

Referencias:

https://sci-hub.tw/10.1016/j.clml.2012.01.005

Técnicas de Edición de Acidos Nucléicos - Leucemia mieloide crónica

 

Tipo de Edición: In vivo y ex vivo / células somáticas

Dirigido hacia: ADN / (inactivación de oncogenes) Ablación del gen de fusión BCR / ABL , provocando la ausencia de expresión de oncoproteínas y bloqueando sus efectos tumorigénicos.

Dirigido por: CRISPR / Cas9

Uso de vectores: Plásmido LentiCas9-Blast y pLKO5.sgRNA.EFS.GFP

Órgano a tratar: Células madre leucémicas de médula ósea

Vía de administración: Parenteral

Resultados a corto, mediano y largo plazo: 

• Aumento significativo en la muerte celular en las células Bcr-Abl-EP
• Inactivar genéticamente los oncogenes BCR / ABL humanos , evitando así su efecto patológico sobre la línea celular Boff-p210.
• Las células editadas con BCR / ABL desarrollaron tumores más pequeños que los que se originan a partir de células parentales Boff-p210 sin editar.
• Prevenir la capacidad tumorigénica de una fusión oncogénica, como BCR / ABL

 

Referencias: 

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5432235/

Transplante alogènico de cèlulas madre en la leucemia mieloide crónica

Tipo de Stem Cell: Células madre hematopoyèticas (mesenquimales)

Método de obtención: 

Las células madre para trasplante se pueden recolectar de: 

Médula ósea: Procedimiento quirúrgico. La introducción de la aguja a través de la piel y dentro del borde del hueso ilíaco. La médula recolectada se pasa a través de una serie de filtros para retirar fragmentos de hueso o tejido, y luego se recolecta en una bolsa de plástico.

Sangre periférica: (PBSCs) por un procedimiento llamado “aféresis”, se extrae la sangre de la persona con una aguja introducida en el brazo y se pasa por una máquina de aféresis la cual separa todas las células madre de la sangre.

La sangre del cordón umbilical y de la placenta contiene células madre. Esta sangre se puede recolectar después del nacimiento de un bebé; la sangre recolectada se llama “unidad de sangre de cordón umbilical”.

Vía de administración: Infusión de células madre. (coloca las células madre del donante en la sangre del paciente a través del catéter para trasplante).

Resultados a corto,mediano y largo plazo:

Cuando un trasplante es exitoso, las células madre del donante pueden restablecer la médula normal, lo que tal vez ofrezca al paciente la única posibilidad para una cura a largo plazo.

Referencias:

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25865648/

https://www.lls.org/sites/default/files/file_assets/PS40S_Blood%20Marrow_SPA_6_16%20Reprint.pdf

Ejemplo de recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza y en la leucemia mieloide crónica

Ejemplo de recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza es el Crossing-over: la recombinación homóloga es un tipo de recombinación genética que ocurre durante la meiosis (formación de las células del óvulo y los espermatozoides). Los cromosomas apareados de los progenitores masculino y femenino se alinean de forma que secuencias similares del ADN se entrecruzan. Este entrecruzamiento produce un intercambio de material genético, el cual es causa importante de la variabilidad genética que se observa en la descendencia.

Fármaco recombinante para leucemia: Interferón- α recombinante

Los interferones son citocinas potentes con actividad antiviral, inmunomoduladora y antiproliferativa.

El interferón alfa-2a es una proteína derivada de ADN recombinante preparada a partir de Escherichia coli modificada genéticamente que contiene el gen del interferón α-2a humano. 

Alimentos transgénicos:

Goldenorange o naranja dorada. Desarrollada en España, concretamente en Valencia. Son naranjas de color amarillo intenso (“golden“) y con un mayor contenido (hasta 36 veces más) en β-caroteno en la pulpa, precursor de la vitamina A. Los investigadores transformaron semillas de naranja dulce para que se bloquee la expresión de un gen endógeno que codifica la β-caroteno hidroxilasa. Por tanto, se acumula el β -caroteno. Esto es responsable del color más intenso puesto que como se sabe, estas moléculas dan el color rojo-anaranjado-amarillo a las plantas. 

Referencias:

https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Recombinacion-homologa

https://www.sciencedirect.com/topics/pharmacology-toxicology-and-pharmaceutical-science/recombinant-alpha2a-interferon

http://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1552&sectionid=90371590

https://www.chilebio.cl/2014/05/23/la-naranja-dorada-el-caso-de-otro-transgenico-de-oro-2/

Metilación específica de PCR (MSP) - Leucemia mieloide crónica

Metilación de ADN en islas CpG y la modificación de histonas son dos mecanismos que conducen al silenciamiento del gen que afecta al promotor del gen . Se informó que los promotores de metilación anormales estaban implicados en la tumorigénesis. El promotor de metilación SFRP2 se detectó en muchos tipos de cánceres. En nuestro estudio, se encontró un nivel bajo de SFRP2 en pacientes con LMC. El resultado de MSP también confirmó que la tasa de metilación de SFRP2 era mayor en la fase acelerada y la fase blástica de la CML. Por lo tanto, especulamos que los niveles bajos de SFRP2 y una alta tasa de metilación están asociados con la progresión de la CML. 

Referencias:

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29704505/

Prueba de tamizaje y una confirmatoria para Leucemia mieloide crónica

Recuento de células sanguíneas

Es una prueba en la que se cuenta el número de diferentes células sanguíneas. Esta prueba frecuentemente incluye un recuento diferencial, que es la cuenta de los diferentes tipos de glóbulos blancos en la muestra de sangre. En un frotis de sangre, se coloca una pequeña cantidad de su sangre en un portaobjetos para analizar las células con un microscopio.

La mayoría de las personas con CML tienen demasiados glóbulos blancos con muchas células jóvenes (inmaduras) llamadas mieloblastos o blastos. Algunos pacientes con CML tienen números bajos de glóbulos rojos o de plaquetas. Aunque estos resultados pueden sugerir la presencia de leucemia, generalmente este diagnóstico necesita confirmarse con otra prueba de sangre o una prueba de médula ósea.

Prueba confirmatoria : Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Esta es una prueba súper sensible que se puede usar para identificar el gen BCR-ABL en las células de la leucemia y medir cuánto hay del mismo. Puede hacerse en muestras de sangre o de médula ósea y puede detectar cantidades muy pequeñas de BCR-ABL, aun cuando los médicos no puedan detectar el cromosoma Filadelfia en las células de la médula ósea mediante pruebas citogenéticas. La prueba PCR se puede utilizar para ayudar a diagnosticar CML. También es útil después del tratamiento para saber si aún hay copias del gen BCR-ABL. Si se encuentran copias de este gen, esto significa que la leucemia sigue presente, aun cuando las células no se pueden observar con un microscopio.

Referecias:

https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=&ved=2ahUKEwjK3cXIu_rqAhXsQ98KHc8DCxcQFjACegQIARAB&url=http%3A%2F%2Fformacion.sefh.es%2Fdpc%2Fsefh-curso-oncohematologia%2Fmodulo_03.pdf&usg=AOvVaw2OwIAGjpgkJGLMfUpU_0q_

https://www.cancer.org/es/cancer/leucemia-mieloide-cronica/deteccion-diagnostico-clasificacion-por-etapas/como-se-diagnostica.html

https://www.cancer.org/es/cancer/leucemia-mieloide-cronica/deteccion-diagnostico-clasificacion-por-etapas/como-se-diagnostica.html

Hibridación in situ con fluorescencia (FISH) - Leucemia

                                        

La leucemia mieloide crónica es producida por un cromosoma Filadelfia (Ph). Por esta razón, constituye un marcador diagnóstico para la enfermedad. A nivel molecular, producto de la t(9;22) se forma el gen de fusión BCR/ABL1 .

La técnica de hibridación in situ por fluorescencia (FISH): es una técnica molecular que utiliza sondas locus-específico que hibridan en una región específica del ADN . Dicha hibridación es detectable, mediante fluorescencia, independientemente de que los núcleos estén en metafase o interfase. La sonda LSI BCR/ABL1 Dual Color Dual Fusion (DCDF) abarca los puntos de ruptura cromosómicas implicados en la t(9;22). Cada cromosoma de interés (el 9 y el 22), se marca con un fluorocromo diferente y genera un patrón de hibridación típico en aquellas células positivas a la translocación. Las variaciones en este patrón de hibridación incluyen, entre otras, deleciones submicroscópicas en el cromosoma 9 derivativo, así como ganancia de un cromosoma Ph lo que genera patrones atípicos de hibridación.

Referencia bibliográfica:

 http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892016000200006